二代测序fastq序列名称格式(illumina NGS)

简介: 二代测序fastq序列名称格式(illumina NGS)

在fastq文件里,会用4行文本来表示一条序列:

在fastq文件里,会用4行文本来表示一条序列:

@SIM:1:FCX:1:15:6329:1045:GATTACT+GTCTTAAC 1:N:0:ATCCGA
TCGCACTCAACGCCCTGCATATGACAAGACAGAATC
+
<>;##=><9=AAAAAAAAAA9#:<#<;<<<????#=


其中第一行文本是序列的名称(read name 或者说read ID),包含了非常多有用的关键信息,每部分信息之间用 ':' 分隔开,从左到右依次看过去:

SIM 表示 instrument ID(即测序仪的硬件ID)

1 表示 run number(该测序仪上的测序顺位数字?)

FCX 表示 followcell ID(测序芯片的ID)

1 表示 lane ID(第几条lane)

15 表示 Tile number(Tile数字)

6329 表示 X coordinate of cluster(桥式PCR生成的簇的横坐标)

1045 表示 Y coordinate of cluster(簇的纵坐标)

GATTACT+GTCTTAAC 表示 read1 UMI ID + read2 UMI ID(拆分数据的UMI序列)

1 表示 read number,1 表示read1,2表示read2

N 表示 Y if the read is filtered (did not pass), N otherwise.(N表示合格,Y不合格)

0 表示 control number(在HiSeq X and NextSeq平台上总是为0)

ATCCGA 表示 index(拆分数据用的index序列)


解释名词

SBS:边合成边测序反应,每次SBS会延伸一个碱基,大约耗时70分钟。

Run:单次上机测序反应,可以产生4G-75G测序通量不等。

Lane:单泳道,每条泳道可以直接物理区分测序样品,1次run最多可以同时上样8条Lane。

Channel:Lane的同义词。

Tile:每次荧光扫描的最小单位,小区,每条Lane中排有2列tile,合计120个小区。每个小区上分布数目繁多的簇结合位点。

Cluster:簇,在Solexa测序技术中会采用桥式PCR方式生产DNA簇,每个DNA簇才能产生亮度达到CCD可以分辨的荧光点。

Index:标签,在Solexa多重测序(Multiplexed Sequencing)过程中会使用Index来区分样品,并在常规测序完成后,针对Index部分额外进行7个循环的测序,通过Index的识别,可以在1条Lane中区分12种不同的样品。

Barcode: Index同义词

Hiseq 2000 与 2500比较:

2000的通量600G/RUN,2500的通量120G/RUN

2000有2个flowcell,每个flowcell8个lane

2500的也是2个flowcell,快速模式中每个flowcell2个lane,每个lane产出30G数据量

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